超高效液相色谱的原理是哪些

时间：2024-01-22 来源：作者：我要纠错

超高效液相色谱（UHPLC）技术由于其高效和快速的分析速度，在现代实验室分析中已越来越受到青睐。它是高效液相色谱（HPLC）技术的一个升级版本，通过使用小于2微米尺寸的颗粒作为固定相，配合更高的操作压力，实现了更快的分析速度和更高的分辨率。UHPLC的发展代表了液相色谱技术的一大进步，使得它成为了许多科研和工业领域中不可或缺的分析工具。

UHPLC的显著特点之一是其使用的固定相颗粒尺寸远小于传统HPLC所使用的。传统HPLC中使用的颗粒尺寸通常在3至5微米之间，而UHPLC能够使用小于2微米的颗粒，这大幅增加了色谱柱的理论塔板数，从而提供了更好的分辨率和峰形。颗粒越小，固定相的表面积就越大，样品分子在固定相与移动相之间的传递也就越迅速，这样不仅提高了分离效率，同时也降低了分析所需的时间。

与此同时，为了适应更小的颗粒和提高的分离效率，UHPLC系统能够承受更高的操作压力，通常超过10000 psi。相比之下，传统的HPLC系统通常工作在不超过3000至5000 psi的压力下。这种高压力的应用，允许使用更细小的柱内径，而且有助于维持合理的流动速率，即使在使用细小颗粒的情况下。这样不仅减少了所需的溶剂量，还缩短了分析时间，提高了样品吞吐量。

高效液相色谱仪的原理是基于混合物中不同组分在固定相与移动相之间的相对亲和力差异。样品在注入系统后，会被移动相（也称为流动相）带入包含固定相的色谱柱。不同的样品组分会由于与固定相的相互作用力不同而在色谱柱中以不同的速度移动，从而实现分离。检测器则根据各组分的特性，如紫外吸收、荧光或折射率等，检测通过色谱柱的组分。每一个组分的检测信号通常被绘制成峰，组成色谱图谱。UHPLC与HPLC在原理上是相同的，只是UHPLC在操作压力、颗粒大小和系统精度上有所提高。